一系列特意为免疫荧光反应封片设计的产品,独特的配方使得染料的荧光不再衰退。常用的抗荧光衰退封片剂有AF1、AF2、AF3、AF4、AF87、AF100、AF200、AF300、CFM-1、CFM-2等等。其中部分产品含DAPI,可衬染细胞核或衬染DNA的实验。
关于抗荧光淬灭剂,常见的三种:酚型的没食子酸丙酯n-Propyl gallate (NPG)、胺型的对苯二胺p-Phenylenediamine (PPD)、胺型的 1,4-Diazabicyclo-octane(DABCO)三乙烯二胺。荧光淬灭的基本理论是这样滴:组织切片中的普通溶解氧在激发态时变成了单线态氧,单线态氧类似氧自由基,这个东西就是荧光淬灭的主要元凶,我们加入的抗淬灭剂主要是与这个元凶反应,直接清除单线态氧。注意,封片剂中加入抗淬灭剂,往往在激发的初级阶段使荧光总量降低,还有与DNA结合染料反应的风险。看看这三种试剂的优缺点吧:PPD可以与花菁染料反应(尤其Cy2),故这类染料封片考虑不用含PPD的封片剂;NPG,无毒,活细胞荧光染色首选这类封片剂,但是NPG对细胞凋亡的过程有所干涉,进行此类研究的同学多注意啦,尽量避开含有NPG的封片剂;DABCO不像PPD那样有效且毒性低,可以用于活细胞,但是与NPG一样,对细胞凋亡的过程有所干涉。
产品选购指南:
AF1:基本成分是甘油、PBS缓冲液、抗荧光淬灭剂、其它成分等,折射率1.46,PH10左右,适于用于检测浸泡在甘油中的组织切片、死细胞、 FISH (including CARD-FISH)等的封片。
AF2:基本成分是甘油、抗荧光淬灭剂、其它成分等,没有自身的缓冲液。折射率1.47,该产品的优势在没有自身缓冲液,可以与任意其它缓冲液相容。
AF3:基本成分是PBS缓冲液、抗荧光淬灭剂、其它成分,折射率1.34,对于活细胞检测特别适用。
AFR3: 基本成分是PBS缓冲液、一种最新型的抗荧光淬灭剂(非胺非酚型)、其他成分等。
AF4:又称Glycerol/n-propyl gallate mounting medium封片剂,添加的抗荧光衰退剂是没食子酸丙酯n-Propyl gallate (NPG)。
AF87:特别的地方是含有无荧光浸油,这是为在高倍镜下观察特别设计的封片剂,对于DAPI染色特别有用(DAPI 在甘油基封片剂中有疏散的倾向)。
AF100:基本成分是PBS缓冲液、抗荧光衰退剂、其他成分等,这是一款不含甘油的封片剂,需要与CFPVOH溶液配套使用。需要预先混合AF100和CFPVOH溶液,用多少混合多少,混合后10小时内用完。该封片剂的折射率1.34-1.35.
AF200:与AF100类同,不同的是,AF200是甘油基的,胺基型抗荧光衰退剂,适于花青素、Alexa、Hoeches等封片。
AF300:与AF100类同,不同的是,AF300是甘油基的,酚基型抗荧光衰退剂。
CFM系列的封片剂的折射率均是1.52,等于或者近似等于所用载片和盖片玻璃的折射率,这对完美图像的获得很有帮助。主要于激光共聚焦显微镜下使用,或者高倍镜需要浸油的情况下来替代浸油。CFM-1的pH约6.5,CFM-1 Plus Antifadent的PH值大约10, CFM-2的pH of约~8.5,CFM-3的PH值接近中性。
货号 | 产品描述 | 规格 |
17970-25 | Citifluor™ AF1 | 25 ml |
17970-125 | Citifluor™ AF1+DAPI | 15ml |
17971-25 | Citifluor™ AF2 | 25 ml |
17972-25 | Citifluor™ AF3 | 25 ml |
17973-10 | Citifluor™ AFR3 | 10ml |
17973-25 | Citifluor™ AF4 | 25ml |
17976-10 | Citifluor™ AF87 | 10 ml |
17977-10 | Citifluor™ AF200 | 10ml |
17977-25 | Citifluor™ AF300 | 10ml |
17977-50 | Citifluor™ PVP-1 | 25ml |
17977-100 | Citifluor™ PVP-1+antifadent | 25ml |
17977-150 | Citifluor™ MWL4-88 | 25ml |
17980-10 | Citifluor™ CFM-1 | 10ml |
17981-10 | Citifluor™ CFM-1+antifadent | 10ml |
17982-10 | Citifluor™ CFM-2 | 10ml |
17979-10 | Citifluor™ CFMR-2 | 10ml |
17979-20 | Citifluor™ CFM-3 | 10ml |
17979-50 | Citifluor™ PF | 10ml |

